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封閉血清適用于免疫組化或者免疫熒光實(shí)驗(yàn)中樣本的封閉。可以封閉待檢樣本中與蛋白質(zhì)非特異性結(jié)合的位點(diǎn),另外還可以封閉樣品中內(nèi)源性的 Fc 片段結(jié)合位點(diǎn),阻斷抗體與樣品中的 Fc 受體結(jié)合,從而降低背景,減少假陽(yáng)性。在選擇封閉血清時(shí),要注意封閉用血清中不能含有目標(biāo)蛋白,且與一抗來(lái)源不同,可用與二抗相同來(lái)源的正常動(dòng)物血清。正常驢血清被廣泛應(yīng)用于組織和細(xì)胞染色中非特異性抗體結(jié)合的阻斷,以及抗體的其他應(yīng)用。血清可直接用于阻斷,或作為阻斷緩沖液的成分。
使用方法:
1. 免疫組化: 用5-10%正常驢血清封閉(1:10-1:20倍稀釋),室溫孵育5-10分鐘。清除血清,勿洗,滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗或一抗工作液,37℃或室溫孵育4℃過(guò)夜。
2. 細(xì)胞涂片: 用5-10%正常驢血清封閉(1:10-1:20倍稀釋),使用 PBS( 0.01mol/L pH7.4)稀釋,少量點(diǎn)滴:漠過(guò)細(xì)胞涂片即可。
3. ELISA:使用 PBS 1:100倍稀釋(PBS,0.01mol/L pH7.4)37℃一小時(shí)。
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